Post by alamin110 on Aug 2, 2023 0:33:06 GMT -5
PureLink RNA Mini Kit（Invitrogen，12183020）提取总 RNA。添加无 RNase 的 DNase（QIAGEN，79254）以减少 DNA 污染。使用Superscript逆转录酶试剂盒(Invitrogen)通过逆转录反应获得cDNA。通过 qRT-PCR 完成指定基因 cDNA 的检测。qRT-PCR 在 AGILENT MX3005P 设备中使用 SYB
蜡切片脱蜡至水，然后放入饱和苦味酸-天狼星红染色溶亚洲手机号码列表液（Servicebio，G1018）中8分钟。用无水酒精冲洗切片数分钟，并在显微镜下观察直至满意为止。然后，将切片在 60°C 烘箱中烘烤，随后在二甲苯中透明 5 分钟。使用中性树胶密封切片。使用显微镜获得图像、收集并分析。 质粒载体构建 为了研究 NSun2 的功能，使用 Tks Gflex DNA 聚合酶（Takara，R060A）从 293T
细胞的 cDNA 文库中扩增特定的人NSun2 CDS (NM_017755.6)。该序列被亚克隆到含有 EF1α 启动子的 pCDH 质粒载体（SBI，CD521A-1）中，然后产生无义突变的 pCDH-h NSun2，使其无法被隐形 RNA 靶向。同时，使用NSun2从PCDH-h NSun2质粒扩增NSun2点突变序列C271A和K190MC271A 和 K190M 点突变引物。同样，这两个到PCDH载体中。Huigene Biotechnology Corporation合成了人或小鼠TSR1 cDNA，然后亚
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